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蛋白表達服務
蛋白表達技術可應用包括基因調控分析、蛋白結構及功能分析、蛋白質間相互作用分析等。對于特定的應用，使用正確的蛋白表達系統是實驗成功的重要因素。在選擇蛋白表達系統時，所需考慮的最重要因素是功能性、可溶性、速度及得率等。三羊開肽生物科技有限公司已成功構建完整的各種蛋白表達技術平臺：包括原核蛋白表達與純化、酵母蛋白表達與純化、昆蟲細胞蛋白表達與純化、哺乳動物細胞蛋白表達與純化。
根據客戶的需求，我們提供從基因合成，載體構建，基因表達，蛋白純化、檢測等一站式服務。
為了保證蛋白純化的質量，三羊開肽生物建立了嚴格的產品質控體系及一整套完善的客戶服務流程、保密制度以確保為客戶提供優質的產品及成熟的服務。 我們的蛋白質團隊在優化基因密碼子、表達載體的設計和構建、融合對象和標簽的選取、特定蛋白純化系統的選擇、蛋白生產工藝的優化等方面，擁有較多的經驗。可以滿足客戶個性化的需求。
原核蛋白表達與純化
原核蛋白表達系統一般以大腸桿菌為宿主細胞。是將植物、動物、微生物等的目的基因插入合適載體后導入大腸桿菌表達出大量目的蛋白。由于細胞增殖快、培養周期短、表達量高、純化方便、穩定性好、抗污染能力強、易于放大和成本低等優勢，原核蛋白表達系統是迄今為止最為成熟可靠、蛋白表達實驗中最常用、最經濟實惠的表達系統。原核蛋白表達這種方法在蛋白純化、定位及功能分析等方面都有應用。
原核蛋白表達技術服務按步驟收費，您可以從以下任意一步選擇開始提供服務或僅選擇其中的單獨一步，詳細價格請垂詢。
如需前期分子生物學技術服務請參考相關內容。
服務特色：
1、提供多種表達載體和E. coli細胞，實現從基因到蛋白表達純化的一站式解決方案，完成您的實驗設計
2、技術成熟穩定、方法手段齊全。
3、服務周期短。
原核蛋白表達與純化服務內容：
1、基因合成，
從基因中搜索目標蛋白的cDNA序列，根據選用的表達系統對cDNA進行密碼子優化。
提供客戶：合成設計好的基因序列及測序序列。
時間： 1~2周
2、載體構建（表達載體的設計和構建、融合對象和標簽的選取。）
擴增并抽提構建好的表達質粒。
將表達質粒轉化到高效的E. coli表達菌株中。
至少挑選數個陽性克隆于LB培養基中擴增并誘導表達目標蛋白。
SDS-PAGE電泳檢測菌株中目標蛋白的表達情況，并挑選合適的單克隆菌株用于目標蛋白的表達。
提供客戶：重組質粒的表達菌株及表達檢測報告。
時間： 1~2周
3、搖瓶培養重組細菌，誘導表達目標蛋白。
對溫度、時間、IPTG濃度等表達進行優化，誘導表達目標蛋白。
通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。
利用蛋白酶去除不需要的純化標簽（Tag），再純化獲得所需的目標蛋白（可選，構建表達載體時需加入合適的蛋白酶切位點）。
三羊開肽生物科技有限公司會通過SDS-PAGE電泳檢測每步結果并控制最終產品質量。
通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。
提供客戶：純化好的目標蛋白及純化報告。可按客戶要求提供含純化標簽（Tag）或切除純化標簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達95%以上。
時間： 2~3周
4、大規模蛋白制備。
對蛋白生產工藝進行優化。按小試工藝放大生產規模，制備客戶需要的合格蛋白產品。
提供客戶：合格的目標蛋白及服務報告。
時間：協商
5、蛋白復性服務。
利用不同復性緩沖液的體系，對目標蛋白進行小量復性試驗提供復性后樣品供客戶檢測。 可根據客戶要求，按照其中一種樣品的復性條件制備小量的復性蛋白。三羊開肽生物科技有限公司可提供具體的復性緩沖液配方及復性工藝。
其他：內毒素去除、除菌，凍干等進一步加工。
通過質譜分析等方法詳細檢測目標蛋白的質量。
提供客戶：加工后的最終產品及相關實驗和檢測報告。
時間：1~2周
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